ig pwr ozzi

70. Rysunek wektora (chyba Shuttle Vector). Co jest charakterystyczne tylko dla drożdży?

Charakterystyka wektora pBluescript II KS

Charakterystyka wektora pBluescript II KS(+/‐):

Zadanie 74. Które ze zdań dotyczących Nukleazy SI są poprawne?

Zadanie 75. Który ze zwiazków może być użyty jako substrat do enzymatycznego znakowania izotopem P32 fragmentu DNA o końcach tępych?

76.Ktore z podanych niżej związków mogą być wykorzystane do znakowania fragmentu DNA przy wykorzystaniu kinazy polinukleotydowej:

77. Dwie próbki kompetentnych komórek E. coli poddano transformacji wektorem / plazmidem zawierającym gen AmpR (oporność na ampicylinę). Do pierwszej próbki dodano niewielką ilość pożywki i wylano na podłoże. Do drugiej również dodano niewielką ilość pożywki i wylano na podłoże bez antybiotyku, inkubowano przez 30 min w 37’C, a później na antybiotyk. Jakie zanotowano obserwacje:

78. Dla elektroforezy nie jest prawdą:

79. Enzym restrykcyjny ClaI rozpoznaje sekwencje ATˇCGAT i trawi wiązanie fosfodiestrowe pomiędzy resztami T i C. Enzym restrykcyjny TaqI rozpoznaje sekwencje TˇCGA:

80. Może być użyty jako substrat do radioaktywnego znakowania fragmentu DNA przy wykorzystaniu fragmentu Klenowa polimerazy I DNA:

81.Zakładajac ze polimeraza Taq nie traci aktywności, a substraty PCR nie ulegają rozkładowi, można powiedzieć, że docelowa sekwencja DNA jest powielona po n-cyklach:

83. Spośród podanych temperatur wybrać która z największym powodzeniem da wydajne otrzymanie produktów PCR przeprowadzając dla startera 5’ GGTAATCGGTTAGGCTCC3’:

84.Który z podanych czynników istotny dla jednej z metod pozwalających na otrzymanie cDNA jest głównym winowajcą odpowiedzialnym za brak w cDNA informacji reprezentującej 5’ koniec transkryptu:

85.Wektor plazmidowy zawiera gen markerowy odpowiadający za odporność na erytromycynę (EryR) i gen markerowy odpowiedzialny za oporność na ampicylinę. Gen AmpR został przecięty enzymem restrykcyjnym a powstały w ten sposób plazmid połączono z fragmentem 1000pz o końcach komplementarnych do wektora. Które z poniższych fenotypów maja komórki transformowane:

93. Rysunek z wektorem YAC

95. Plazmid X ma gen markerowy AmpR czyli na ampicyline opornosc. Bierzemy jakiś inny plazmid co ma geny oporności na ampicylinę, chloramfenikol, erytromycynę, itp, itd. Tniemy go i kolekcję otrzymanych fragmentów wklonowujemy w nasz plazmid X, ten przenosimy do komórek i szukamy rekombinantów które dostały gen ooprności na chloramfenikol - jakich podłóż możemy użyć:

97. Podane nizej enzymy restrykcyjne trawia DNA w specyficznych miejscach (jak ponizej): BamHI NheI Xbal EcoRI 5’-GˇGATCC-3’ 5’-GˇCTAGC-3’ 5’-TˇCTAGA-3’ 5’-GˇAATTC-3’ 3’-CCTAG^G-5’ 3’-CGATC^G-5’ 3’-AGATC^T-5’ 3’-CTTAA^G-3’ Wszystkie one hydrolizuja wiazanie fosfodiestrowe pomiedzy pierwszym a drugim nukleotydem (liczac od 5' konca każdej linii), przy czym produkty ....(tu niestety brak tresci ale to raczej malo istotne) Sposrod podanych ponizej zdan prosze wybrac prawdziwe:

98. były różne wartości/ W celu przeprowadzenia trawienia enzymem restrykcyjnym XYZ do 14ml próbki zawierającej DNA dodano 2 ml odpowiedniego dla tego enzymu buforu, 2 ml roztworu zawierającego enzym i 2 ml wody destylowanej, tak przygotowana mieszanina reakcyjna pracowała na optymalnych parametrach i z dużą wydajnością substratową. Wiedząc, że optymalne dla enzymu XYZ stężenie NaCl wynosi 100mM można wywnioskować iż w buforze wyjściowym wartość stężenia tej soli wynosi:

99. Mamy16 μl DNA w probowce. Do tego dodajemy kolejno 2 μl buforu oraz 2 μl roztworu z enzymem. Skoro optymalne stężenie NaCl dla enzymu to 50mM to jakie bylo wyjsciowe stezenie tej soli dodawanym buforze

100. Mamy opisany eksperyment restrykcji jakiegoś faga. Najpierw 14ul DNA w probówce. Do tego dodajemy kolejno: 2ul buforu i 2 ul roztworu z enzymem. Skoro optymalne stężenie NaCl dla enzymu to 100mM to jakie było wyjściowe stężenie tej soli dodawanym buforze?