Strona 4

inżynieria genetyczna

Przejdź na Memorizer+
W trybie testu zyskasz:
Brak reklam
Quiz powtórkowy - pozwoli Ci opanować pytania, których nie umiesz
Więcej pytań na stronie testu
Wybór pytań do ponownego rozwiązania
Trzy razy bardziej pojemną historię aktywności
Wykup dostęp
Pytanie 25
25. Spośród podanych poniżej zestawów proszę wybrać zawierający najwłaściwsze uzupełnienia dla następującego twierdzenia: “ddNTP, używany do sekwencjonowania DNA metodą Sangera charakteryzuje się tym, że nie posiada on …....... przy węglach …..... i ….... .”
d) OH, 2’, 5’
b) metyl, 2’, 3’
a) OH, 2’, 3’
c) karboksyl, 2’, 3’
e) żaden z powyższych
Pytanie 26
26. Jednym z etapów eksperymentu zmierzającego do izolacji nieznanego czynnika transkrypcji (represora XYZ) była chromatografia jonowymienna. W celu identyfikacji frakcji zwierających ten czynnik posłużono się techniką odcisku stopy z wykorzystaniem DNazy I (ang. Dnase I footprinting). Jako sondę użyto znakowany radioizotopowo fragment DNA zawierający sekwencje elementu regulatorowego specyficznie oddziałującego z represorem XYZ. Na rysunku poniżej przedstawiono wyniki analizy autoradiograficznej żelu poliakrylamidowego otrzymanego po wykonaniu DNase I footprinting dla 22 frakcji (od 1 do 22) jakie otrzymano po chromatografii. Na autoradiogramie widoczne są też inne kontrolne/ pomocnicze ślady. Na podstawie analizy autoradiogramu można przypuszczać, że:
c) ślad oznaczony literą O odpowiada preparatowi naniesionemu na kolumnę jonowymienną, czyli poddawanemu na niej rozdziałowi
b) represor jest z całą pewnością obecny we frakcjach od 9 do 12
e) ślad oznaczony literami FT to ślad kontrolny, który z całą pewnością nie zwiera represora XYZ
a) we frakcji 18 obecny jest represor XYZ
d) ślad oznaczony literą NE odpowiada preparatowi naniesionemu na kolumnę jonowymienną, czyli poddawanemu na niej rozdziałowi
Pytanie 27
27. Produkty PCR, otrzymane przy pomocy polimerazy Taq zazwyczaj zawierają na swoich 5’ koncach niesparowane reszty A. Fakt ten można wykorzystać do klonowania tych produktów przy pomocy zlinearyzowanego, tzn. występującego w formie liniowej cząsteczki ds DNA, wektora plazmidowego posiadajacego na 3’ końcach komplementarne do produktu PCR reszty. Wektor w formie bezpośrednio nadającej się do ligacji z produktami PCR można otrzymac w laboratorium. W tym celu wektor plazmidowy jest trawiony w obrębie sekwencji polilinkerowej przez enzym restrykcyjny, którego produkty mają końce tępe. Spośród podanych poniżej enzymów/ odczynników prosze wybrać te, które pozwolą otrzymać, z tak przygotowanego wektora, wektor w formie nadającej się do klonowania zdefiniowanych powyżej produktów PCR:
c) polimeraza Taq
e) polimeraza Vent
d) dideoksy TTP
b) dTTP
a) terminalna transferaza
Pytanie 28
28. W celu wyznaczenia sekwencji 5’ końca transkryptu można posłużyć się metodą RACE. Kluczowym etapem RACE jest synteza polinukleotydu komplementarnego do transkryptu. Spośród enzymów/ odczynników podanych poniżej proszę wybrać te, które mogą być w tym celu użyteczne:
d) fragment Klenowa polimerazy DNA I
a) starter oligo (T) [z wykładu: oligo(dT)]
c) dNTP
e) krótki oligonukleotyd komplementarny do sekwencji genu kodującego transkrypt
b) odwrotna transkryptaza
Pytanie 29
29. Które z podanych poniżej informacji są prawdziwe w odniesieniu do ligacji fragmentów DNA o koncach tępych przy pomocy topoizomerazy DNA?
e) tworzy 4 wiązania fosfodiestrowe
a) ligacja tego typu wymaga wektora, który musi byc poddany linearyzacji przy pomocy enzymu restrykcyjnego dającego produkty o końcach tępych
b) wektor przygotowany do ligacji przy pomocy topoizomerazy, może też być, bez żadnych dodatkowych zabiegów, użyty do ligacji z syntetycznym ds. oligonukleotydem, przy pomocy ligazy T4
d) reakcja ligacji przy pomocy topoizomerazy skutkuje powstaniem rekombinowanego DNA, w którym brakuje dwóch wiązań fosfodiestrowych, wiązania te są formowane, po transformacji, przez geny komórki bakteryjnej
c) fragmenty DNA poddawane ligacji z wektorem, przy pomocy topoizomerazy, muszą posiadać końce tępe, pozbawione reszt kwasu fosforowego, reszt które obecne są po otrzymaniu fragmentu na drodze trawienia DNA enzymem restrykcyjnym
Pytanie 30
30. Indukowane przez wirusa wyciszanie genów (virus induced gene silencing VIGS) to technika:
c) która pozwala określić funkcje genu na podstawie skutków/ zmian jakie powoduje degradacja jego transkryptu
a) którą stosuje się przede wszystkim do badania funkcji genów wirusów roślinnych
b) której kluczowym elementem jest wektor będący pochodną wirusa gemini zawierający gen roślinny, którego funkcja jest badana
d) w której wykorzystuje się naturalna zdolność/ skłonność wirusów gemini do rearanżacji i delecji
e) w której wykorzystuje się naturalny mechanizm obronny komórek roślinnych przed infekcją wirusową- skutkujący degradacją genomu wirusa
Pytanie 31
31. Które z podanych poniżej informacji są prawdziwe w odniesieniu do eksperymentu pirosekwencjonowania DNA?
e) jednoczesne równoległe pirosekwencjonowanie wielu fragmentów DNA jest wykonywane po PCR w emulsji, PCR jest przeprowadzane niezależnie dla każdego fragmentu, jednak z użyciem różnych starterów
b) pojedynczy eksperyment pirosekwencjonowania pozwala na poznanie dłuższej sekwencji niż w metodzie Sangera
a) sekwencjonowanie tą metodą wymaga otrzymania ss DNA
c) podczas pirosekwencjonowania sekwencja jest odczytywana na podstawie informacji o wbudowaniu kolejnych dideoksynukleotydów
d) podczas pirosekwencjonowania długość emisji światła (chemiluminescencji) resjtrowana po inkubacji z kolejnym dNTP, zależy od ilości uwolnionych cząsteczek pirofosforanu, a więc od ilości wbudowanych reszt.
Pytanie 32
32. Które z poniższych twierdzeń jest prawdziwe w odniesieniu do real- time PCR?
c) ilość produktu powstającego podczas real- time PCR może być precyzyjnie określona przez pomiar fluorescencji związku specyficznie wiążącego (niekowalencyjnie) ds DNA
b) metoda ta pozwala na określenie ilości transkryptów analizowanego genu- wymaga użycia na poczatku doświadczenia odwrotnej transkryptazy
e) metoda ta jest tożsama z tzw. ilościową PCR (quantitative PCR)
a) metoda ta pozwala na określenie ilości DNA w analizowanej próbce
d) ilość produktu powstającego podczas real- time PCR może być precyzyjnie określona przez pomiar fluorescencji związku kowalencyjnie przyłączonego do jednego z końców oligonukleotydu pełniącego funkcję specyficznej sondy wiążącej się z produktem amplifikacji