Nauka

inżynieria genetyczna

Wyświetlane są wszystkie pytania.
Pytanie 57
57. (otwarte) Co byłoby skutkiem całkowitego zastąpienia jednego z dNTP mieszaniny reakcyjnej używanej do sekwencjonowania DNA metodą Sangera przez jego 2’,3’- dideoksyanalog? Odpowiedź proszę uzasadnić ZOBACZYĆ W BAZIE
Pytanie 58
58. Spośród podanych poniżej zestawów proszę wybrać zawerający najwłaściwsze uzupełnienia dla następującego twierdzenia: “ddNTP, używany do sekwencjonowania DNA metodą Sangera charakteryzuje się tym, że nie posiada on …....... przy węglach …..... i ….... .”
a) OH, 2’, 3’
d) OH, 2’, 5’
b) metyl, 2’, 3’
e) żaden z powyższych
c) karboksyl, 2’, 3’
Pytanie 59
59. Które z poniżych twierdzeń jest prawdziwe w odniesieniu do real- time PCR?
f) stosuje się związek wiążący się niekowalencyjnie do dwuniciowego DNA- barwnik wiąże się do dwuniciowego DNA, tyle jest w książce, ale nie wiem jakie jest to wiązanie, czy kowalencyjne czy też nie? Zaznaczam na czerwono dlatego.
b) metoda ta pozwala na określenie ilości transkryptów analizowanego genu
e) metoda ta jest tożsama z tzw. ilościową PCR (quantitative PCR)
g) stosuje się sondę reporterową hybrydyzującą z produktem
a) metoda ta pozwala na określenie ilości DNA w analizowanej próbce
h) może służyć do oznaczenia stężenia RNA, jeśli na początku eksperymentu użyje się odwrotnej transkryptazy
c) ilość produktu powstającego podczas real- time PCR może być precyzyjnie określona przez pomiar fluorescencji związku specyficznie wiążącego (niekowalencyjnie) dsDNA
d) ilość produktu powstającego podczas real- time PCR może być precyzyjnie określona przez pomiar fluorescencji związku kowalencyjnie przyłączonego do jednego z końców oligonukleotydu pełniącego funkcję specyficznej sondy wiążącej się z produktem amplifikacji
Pytanie 60
60. Które z podanych poniżej informacji są prawdziwe w odniesieniu do ligacji fragmentów DNA o koncach tępych przy pomocy topoizomerazy DNA?
a) ligacja tego typu wymaga wektora, który musi byc poddany linearyzacji przy pomocy enzymu restrykcyjnego dającego produkty o końcach tępych
d) reakcja ligacji przy pomocy topoizomerazy skutkuje powstaniem rekombinowanego DNA, w którym brakuje dwóch wiązań fosfodiestrowych,( wiązania te są formowane, po transformacji, przez geny komórki bakteryjnej
f) tworzy 4 wiązania fosfodiestrowe (tworzy 2 wiązania)Ligacja tępych końców za pomocą topoizomerazy DNA.
c) fragmenty DNA poddawane ligacji z wektorem, przy pomocy topoizomerazy, muszą posiadać końce tępe, pozbawione reszt kwasu fosforowego
e) produkty nie posiadają 4 wiązań fosfodiestrowych
b) wektor przygotowany do ligacji przy pomocy topoizomerazy, może też być, bez żadnych dodatkowych zabiegów, użyty do ligacji z syntetycznym ds. oligonukleotydem, przy pomocy ligazy T4
Pytanie 61
61. Które z podanych poniżej informacji są prawdziwe w odniesieniu do eksperymentu pirosekwencjonowania DNA?
d) podczas pirosekwencjonowania długość emisji światła (chemiluminescencji) rejestrowana po inkubacji z kolejnym dNTP, zależy od ilości uwolnionych cząsteczek pirofosforanu, a więc od ilości wbudowanych reszt.
e) jednoczesne równoległe pirosekwencjonowanie wielu fragmentów DNA jest wykonywane po PCR w emulsji, PCR jest przeprowadzane niezależnie dla każdego fragmentu, jednak z użyciem różnych starterów.
a) sekwencjonowanie tą metodą wymaga otrzymania ssDNA
c) podczas pirosekwencjonowania sekwencja jest odczytywana na podstawie informacji o wbudowaniu kolejnych dideoksynukleotydów.
f) ciąg identycznych zasad daje sygnał silniejszy.
b) pojedynczy eksperyment pirosekwencjonowania pozwala na poznanie dłuższej sekwencji niż w metodzie Sangera / jednorazowo sekwencjonuje się odcinki DNA dłuższe niż przy zastosowaniu metody Sangera.
Pytanie 62
62. Wektor będący pochodną faga lambda (lambda EMBL4; replacement vector) poddano trawieniu enzymem EcoRI, a następnie powstałe produkty rozdzielono elektroforetycznie. Otrzymane w ten sposób “ramiona” wektora poddano ligacji z fragmentami DNA o końcach EcoRI i długości około 20 kb. Po ligacji upakowano fagi in vitro i infekowano nimi bakterie. Analizie poddano DNA wszystkich powstałych łysinek i zidentyfikowano takie, które zawierały:
c) DNA rekombinowanego wektora zawierającego fragmenty DNA o długości ok. 40 kb.
a) DNA wektora, który uległ religacji.
b) DNA rekombinowanego wektora zawierającego fragmenty DNA o długości ok. 20 kb.
d) DNA całego genomu faga .
e) brak łysinek ponieważ sekwencja była za długa.
Pytanie 63
63. W pewnym laboratorium prowadzono badania, których celem było scharakteryzowanie aktywatora transkrypcji genu glukokinazy wątrobowej. W tym celu korzystając z odpowiedniej biblioteki sklonowano gen, z wysokim prawdopodobieństwem kodujący ten aktywator. W celu eksperymentalnego potwierdzenia, że otrzymany DNA rzeczywiście koduje aktywator posłużono się testem zilustrowanym na przedstawionym poniżej schemacie. W teście tym wykorzystano dwa plazmidy - jeden z nich zawierał gen kodujący aktywator, drugi gen reporterowy. Plazmidami tymi transfekowano odpowiednie komórki. Które z poniższych twierdzeń są prawdziwe w odniesieniu do testu zilustrowanego na schemacie:
a) plazmid oznaczony numerem 1 zawiera gen reporterowy, a plazmid oznaczony numerem 2 gen kodujący aktywator.
e) żadne z powyższych twierdzeń nie jest prawdziwe
b) plazmid oznaczony numerem 2 zawiera gen reporterowy, a plazmid oznaczony numerem 1 gen kodujący aktywator.
c) pojawienie się transkryptów genu reporterowego w komórce zależy od oddziaływania produktu sklonowanego genu z elementem regulatorowym, kontrolującym transkrypcję genu reporterowego
d) element regulatorowy, obecny w plazmidzie z genem reporterowym, to sekwencja specyficznie wiążąca produkt genu reporterowego
Pytanie 64
64. Jednym z etapów eksperymentu zmierzającego do izolacji nieznanego czynnika transkrypcji (represora XYZ) była chromatografia jonowymienna. W celu identyfikacji frakcji zawierających ten czynnik posłużono się techniką odcisku stopy z wykorzystaniem DNazy I (ang. Dnase I footprinting). Jako sondę użyto znakowany radioizotopowo fragment DNA zawierający sekwencje elementu regulatorowego specyficznie oddziałującego z represorem XYZ. Na rysunku poniżej przedstawiono wyniki analizy autoradiograficznej żelu poliakrylamidowego otrzymanego po wykonaniu DNase I footprinting dla 22 frakcji (od 1 do 22) jakie otrzymano po chromatografii. Na autoradiogramie widoczne są też inne kontrolne/ pomocnicze ślady. Na podstawie analizy autoradiogramu można przypuszczać, że:
a) we frakcji 18 obecny jest represor XYZ
d) ślad oznaczony literą NE odpowiada preparatowi naniesionemu na kolumnę jonowymienną, czyli poddawanemu na niej rozdziałowi
e) ślad oznaczony literami FT to ślad kontrolny, który z całą pewnością nie zwiera represora XYZ
b) represor jest z całą pewnością obecny we frakcjach od 9 do 12
c) ślad oznaczony literą O odpowiada preparatowi naniesionemu na kolumnę jonowymienną, czyli poddawanemu na niej rozdziałowi
Przejdź na Memorizer+
W trybie nauki zyskasz:
Brak reklam
Quiz powtórkowy - pozwoli Ci opanować pytania, których nie umiesz
Więcej pytań na stronie testu
Wybór pytań do ponownego rozwiązania
Trzy razy bardziej pojemną historię aktywności
Wykup dostęp