Nauka: inżynieria genetyczna / Memorizer

Pytanie 17

17.Fragmenty (ramiona - w sumie 30kb) WEKTORA ZASTĘPCZEGO poddawano ligacji z fragmentami DNA majacymi prawidlowe konce lepkie odpowiednie do ramion wektora. Jaki maksymalny rozmiar mogl mieć wsczepiany w ten wektor odcinek:

B)40kb

C)100kb

E)22kb

A)8kb

D)20kb

Pytanie 18

18.Doświadczenie ktorego celem jest nokaut genu mysiego XYZ. Komórki macierzyste, do których wprowadzany jest gen rekombinowany:

B) zawierają oba allele typu dzikiego

C) poddawane są selekcji, ktorej celem jest wybrac te w ktorych zaszla rekombinacja niehomologiczna

D) sa oporne na dzialanie neomycyny

A) zawierają 1 allel zmutowany i 1 typ dzikiego genu XYZ

E) zawieraja gen Tk

Pytanie 19

19.Kulisty DNA poddano linearyzacji enzymem dajacym konce lepkie. Nastepnie potraktowano go nukleza S1 i po zahamowaniu aktywnosci tejze nukleazy uzyto terminalej transferazy przy obecnosci dNTP. Najprawdopodobniej końce powstalego fragmentu DNA beda mialy charakter taki jak te pokazane w punkcie :

B) 5’AGCAATGG3’ 3’ACC5’

D) 5’ACTAGCAA3’ 3’TCGTTACC5’

A) 5’AGCAATGGC3’ 3’AGCTTCGT5’

C) 5’AGCAATGG3’ 3’TCGTTACC5’

E)zadne z powyzszych - nie wiadomo jaka poczatkowa sekwencja byla

Pytanie 20

20. Pewien haploidalny szczep grzybaa Neurospora jest transgeniczny pod wzgledem genu lucyferazy. Gen ten nie wystepuje w szczepie dzikim. Szczep transgeniczny zostal skrzyzowany ze szczepem dzikim a powstale askospory poddano analizie PCR wykorzystujac startery specyficzne dla genu lucyferazy. Zakladajac, ze PCR przeprowadzono w sposob optymalny mozna przypuszczac ze udzial askospor dla ktorych zidentyfikowano specyficzny produkt wynosil :

E)100%

D) 75%

B) 25%

C) 50%

A) 0%

Pytanie 21

21. Poniżej podany jest schemat wektora. Korzystając z zawartych w schemacie informacji proszę wybrać te z cech/ charakterystyk, które są prawdziwe:Rys. Mapa wektora pGEM T Zaznaczono geny: amp oporności na ampicylinę, origin replikacji, lacZ oraz promotory T7 i SP6. Zaznaczono również miejsce do klonowania, które jest przerwane, a jego sekwencja na końcu 3’ zawiera tymidynę (T), co pozwala na szybkąligację odpowiednich produktów po reakcji PCR z wektorem.  Wektor ten posiada 3’ terminalne tymidyny, co zapobiega jego recyrkularyzacji, a jednoczeście pozwala na ligowanie z nim produktów reakcji PCR bez potrzeby cięcia nukleazami.  Jest to możliwe, ponieważ niektóre polimerazy (np. Taq polimeraza) pozostawiają na 3’ końcach wolne nukleotydy adeninowe komplementarne do pojedynczych tymidyn wektora pGEM-T Easy.

b) wektor jest kosmidem (nie ma sekwencji cos)

d) wektor pozwala na badanie aktywności promotorów eukariotycznych w komórkach prokariotycznych

a) wektor posiada gen markerowy, który może być użyty do selekcji transformantów w komórkach drożdżowych

c) korzystając z wektora można otrzymać produkty, które posłużyć mogą do otrzymania ds RNA

e) korzystając z tego wektora można otrzymać ss DNA

Pytanie 22

22. Wektor będący pochodną faga lambda (lambda EMBL4; replacement vector) poddano trawieniu enzymem EcoRI, a następnie powstałe produkty rozdzielono elektroforetycznie. Otrzymane w ten sposób “ramiona” wektora poddano ligacji z fragmentami DNA o końcach EcoRI i długości około 20 kb. Po ligacji upakowano fagi in vitro i infekowano nimi bakterie. Analizie poddano DNA wszystkich powstałych łysinek i zidentyfikowano takie, które zawierały:

d) DNA całego genomu faga c) i d)

b) DNA rekombinowanego wektora zawierającego fragmenty DNA o długości ok. 20 kb

a) DNA wektora, który uległ religacji

e) nie zidentyfikowano żadnych łysinek

c) DNA rekombinowanego wektora zawierającego fragmenty DNA o długości ok. 40 kb

Pytanie 23

23. W analizie Southern (ang. Southern hybridization) fragment sekwencji genu aktyny z drożdży został użyty jako sonda do analizy fragmentów powstałych w wyniku trawienia EcoRI DNA genomowego z D. stramonium. Na autoradiogramie zaobserwowano jedno pasmo odpowiadające cząsteczkom DNA o długości 4 kb. Oznacza to, że:

e) gen aktyny D. stramonium posiada identyczną sekwencję jak gen drożdżowy

c) w preparacie DNA D. stramonium były obecne sekwencje DNA w znacznej mierze podobne do sekwencji sondy

d) gen aktyny D. stramonium jest obecny w 4 kopiach w genomie

a) gen aktyny D. stramonium ma długość 4 kb

b) gen aktyny D. stramonium jest takiej samej wielkości jak gen drożdżowy

Pytanie 24

24. W pewnym laboratorium prowadzono badania, których celem było scharakteryzowanie aktywatora transkrypcji genu glukokinazy wątrobowej. W tym celu korzystając z odpowiedniej biblioteki sklonowano gen, z wysokim prawdopodobienstwem kodujący ten aktywator. W celu eksperymentalnego potwierdzenia, że otrzymany DNA rzeczywiście koduje aktywator posłużono się testem zilustrowanym na przedstawionym poniżej schemacie. W teście tym wykorzystano dwa plazmidy - jeden z nich zawierał gen kodujący aktywator, drugi gen reporterowy. Plazmidami tymi transfekowano odpowiednie komórki. Które z poniższych twierdzeń są prawdziwe w odniesieniu do testu zilustrowanego na schemacie

c) pojawienie się transkryptów genu reporterowego w komórce zalezy od oddziaływania produktu sklonowanego genu z elementem regulatorowym, kontrolującym transkrypcję genu reporterowego

a) plazmid oznaczony numerem 1 zawiera gen reporterowy, a plazmid oznaczony numerem 2 gen kodujący aktywator

e) żadne z powyższych twierdzeń nie jest prawdziwe

b) plazmid oznaczony numerem 2 zawiera gen reporterowy, a plazmid oznaczony numerem 1 gen kodujący aktywator

d) element regulatorowy, obecny w plazmidzie z genem reporterowym, to sekwencja specyficznie wiążąca produkt genu reporterowego