Pytanie 18
Które z poniższych stwierdzeń dotyczących eksperymentu klonowania Insertu (kolor pomarańczowy) ograniczonego miejscami restrykcyjnymi HindIII, do wektora plazmidowego pETX5, zobrazowanego schematycznie na rysunku są prawdziwe? Zwróć uwagę, że wektor pETX5 zawiera geny (kolor niebieski i czerwony) nadające bakteriom oporność na dwa antybiotyki - ampicylinę (Amp r) oraz tetracyklinę (Tet r)
na podłożu zawierającym oba antybiotyki zginą tylko te komórki, które pobrały wektor zawierający insert oraz te które nie uległy transdukcji
w celu poprawnego wklonowania insertu do wektora, koniecznie trzeba użyć kinazy polinukleotydowej i ATP, żeby ufosforylować odpowiednie końce DNA w obu cząsteczkach
Aby za pomocą genów markerowych AmpR i TetR wyselekcjonować komórki, które zawierają wektor z włączonym insertem, konieczne jest wykonanie repliki kolonii z podłoża zawierającego oba antybiotyki, na podłoże zawierające tetracyklinę
Na podłożu z tetracykliną zginą wszystkie komórki które pobrały wektor
Aby za pomocą genów markerowych AmpR i TetR wyselekcjonować komórki, które zawierają wektor z włączonym insertem, konieczne jest wykonanie repliki kolonii z podłoża zawierającego tetracyklinę na podłoża zawierające oba antybiotyki
na podłożu z ampicyliną przeżyją wszystkie komórki które pobrał pusty wektor (bez insertu)
na podłożu z ampicyliną przeżyją tylko te komórki które pobrał pusty wektor (bez insertu)
Eksperyment ten został zaplanowany nieprawidłowo, ponieważ do przecięcia wektora należałoby użyć enzymu BamHI, aby włączyć ten insert do wektora
Na podłożu z tetracykliną przeżyją wszystkie komórki które pobrały wekto
Włączenie insertu do wektora w miejsce HindIII nie ma kompletnie sensu, ponieważ przerywa ciągłość genu AmpR niezbędnego do przeżycia komórek na podłożu z ampicyliną
na podłożu zawierającym oba antybiotyki zginą tylko te komórki, które pobrały wektor zawierający insert oraz te które nie uległy transformacji
Na podłożu z ampicyliną zginą tylko te komórki które pobrały wektor zawierający insert
Na podłożu z ampicyliną zginą wszystkie komórki które pobrały wektor zawierający insert