Strona 1
3. Poznawanie białek i proteomów
Pytanie 1
Czym jest aktywność katalityczna?
stosunek całkowitej aktywności enzymatycznej do całkowitej ilości białka w preparacie
stosunek aktywności specyficznej na kolejnych etapach do wyjściowej aktywności specyficznej
stosunek całkowitej aktywności na kolejnych etapach do całkowitej aktywności wyjściowej
początkowa szybkość reakcji (V0), wyznaczana w optymalnych warunkach, przy wysycającym stężeniu substratu, wyrażająca ilość powstającego produktu (lub zużywanego substratu) w jednostce czasu w określonej temperaturze.
Pytanie 2
Uszereguj kationy ze względu na wzrastająca siłę wysalającą
Th3+ > Al2+ > Se2+ > Sr2+ > Ca2+ > Mg2+ > NH4+ > Na+ > Li+
Li+ > Na+ > NH4+ > Mg2+ > Ca2+ > Sr2+ > Se2+ > Al2+ > Th3+
Pytanie 3
Czym jest wysalanie?
efekt zwiększania się rozpuszczalności białek w stężonych roztworach soli
efekt zmniejszania się rozpuszczalności białek w stężonych roztworach soli
uszkodzenie pierwszorzedowej struktury białka natywnego.
uszkodzenie trzeciorzędowej i czwartorzędowej struktury białka natywnego.
Pytanie 4
Który związek jest najczęściej stosowany do wysalania białka?
Pytanie 5
Od czego jest skrót SDS?
Pytanie 6
Które zdania na temat wirowania są prawdziwe?
Im WIĘKSZA wartość S tym WOLNIEJ porusza się cząsteczka w polu wirowania
Jest to metoda służąca do rozdzielania białek o różnym współczynniku sedymentacji
Można rozdzielić białka różniące się przynajmniej 2x współczynnikiem sedymentacji
Może służyć do oznaczania masy cząsteczkowej białek oraz ich gęstości
może zachodzić w rotorze uchylnym
Pytanie 7
Czym jest test ELISA?
Służy do rozdzielania białek o różnym współczynniku sedymentacji
W tej metodzie produkt (najczęściej barwny) można ocenić ilościowo metodą spektrofotometryczną, służącą do pomiaru intensywności barwy.
Polega na kolejnym odszczepianiu wyznakowanych reszt aminokwasowych od końca aminowego peptydu
Umożliwia identyfikację konkretnego białka w preparacie białek rozdzielonych za pomocą elektroforezy
Służy do ilościowego oznaczania przeciwciała lub antygenu za pomocą specyficznych przeciwciał
Pytanie 8
Jakie techniki detekcji są stosowane w technice Western blot?
chemifluorescencja- produkt reakcji jest fluorescencyjny
bioluminescencja - podczas reakcji enzymatycznej emitowane jest światło (substratami są pochodne fluoresceiny)
autoradiografia - Przeciwciało drugorzędowe znakowane izotopowo
immunogold - przeciwciało drugorzędowe jest znakowane złotem, sygnał jest wzmacniany przez „wysrebrzanie” oparte na zdolności metalicznego Au do redukcji Ag w obecności substancji redukującej (np. hydrochinonu)
Pytanie 9
Połącz w pary odczynnik z jego zastosowaniem
Identyfikacja końcowej reszty aminowej peptydu (którego ilość nie przekracza 0,1ug)
Chlorek dansylu lub chlorek dabsylu
odwracalna denaturacja białka pozbawionego mostków dwusiarczkowych
Mocznik
Odwracalna denaturacja białka które ma mostki dwusiarczkowe
Mocznik oraz beta-merkaptoetanol
Zerwanie wiązań peptydowych po karboksylowej stronie reszt metroninowych
CNBr
Hydroliza wiązań peptydowych po karboksylowej stronie reszt lizyny i argininy
Trypsyna
Oznaczanie sekwencji małego peptydu
Fenyloizotiocyjanian
Hydroliza wiązań peptydowych po karboksylowej stronie reszt aminokwasów aromatycznych
Chymotrypsyna